T淋巴细胞在小鼠肾缺血再灌注损伤中的作用

维普资讯 http://www.cqvip.com ２Ｏ０７年２月　中国实验动物学报　ＡＣＴＡ　ＬＡＢＯＢＡＴＯＢＩＵＭ　ＡＮＩＭＡＬＩＳ　ＳＣＩＥＮＴＩＡ　ＳＩＮＩＣＡ　Ｆｅｂ．，　２Ｏｏ７　Ｖ０１．１５　Ｎｏ．１　、　第１５卷第１期　ｅ　）　研究报告５５　蝗　七　、、蛉ｅ　、　Ｔ淋巴细胞在小鼠肾缺血再灌注损伤中的作用　陈恕求，陈　明，张古田，李俊龙，彭　涛，孙则禹　（南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科，南京２１０００８）　【摘要】　目的研究Ｔ淋巴细胞在肾缺血再灌注损伤（ｉａ）导致的急性肾损害中的作用。方法　ＢＡＬＢ／ｃ小鼠　ｒ和ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠各２４只，分别随机分为Ａ。一．组和Ｂ。一．组，每组６只。双肾蒂阻断４５　ｍｉｎ后恢复血流建立肾ＩＲＩ模　型，假手术对照组、ｌＲＩ后２４、４８和７２　ｈ时检测ｓｃｒ、尿蛋白定量及肾病理学，Ａ组检测脾Ｔ细胞亚群；对比ＢＡＬＢ／ｃ小　鼠和ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠的肾功能下降、组织学损害程度以及脾Ｔ淋巴细胞亚群变化。结果　Ａ２一．组和Ｂ２一．组均有Ｓｃｒ　和尿蛋白定量明显升高（Ｐ＜０．０５），且Ａ组损害程度明显重于Ｂ组（Ｐ＜０．０５）；Ａ２一．组出现典型的ＩＲＩ组织损害表现　（Ｐ＜０．０５），Ｂ２一．组无明显ＩＲＩ组织损害（Ｐ＞０．０５）；Ａ２—３组脾ＣＤ３’Ｔ细胞百分比较Ａ。组升高（Ｐ＜０．０５），而ＣＤ４　，　ＣＤ８　比值无明显变化（Ｐ＞０．０５）。结论Ｔ淋巴细胞是小鼠肾ＩＲＩ导致急性肾损害的重要病理生理学因素。　【关键词】Ｔ淋巴细胞；再灌注损伤；肾；小鼠　【中图分类号】Ｒ３１８．０６　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００５．４８４７（２００７）Ｏ１．００２１．０４　Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　Ｔ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　Ｒｅｎａｌ　ｌｓｃｈｅｍｉａ—Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　Ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　Ｍｉｃｅ　ＣＨＥＮ　Ｓｈｕ－ｑｉｕ，ＣＨＥＮ　Ｍｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｇｕ・ｔｉａｎ，ＬＩ　Ｊｕｎ－ｌｏｎｇ，ＰＥＮＧ　Ｔａｏ，ＳＵＮ　Ｚｅ・ｙｕ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｕｒｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｄｒｕｍ　Ｔｏｗｅｒ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｈｏｏｌ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１０００８，Ｃｈｉｎａ）　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｉｔｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｅｐｅｒｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＢＡＬＢ／ｃ　ｗｉｌｄ・ｍｉｃｅ（ｇｒｏｕｐ　Ａ，ｎ＝２４）ａｎｄ　ＢＡＬＢ／ｃ　ｎｕｄｅ・ｍｉｃｅ（ｇｒｏｕｐ　Ｂ，ｎ＝２４）ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ（ｎ＝６），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｔｈｅ　ｇｒｏｕｐｓ　Ａｌ　ｔｏ　Ａ４　ａｎｄ　ｇｒｏｕｐｓ　Ｂｌ　ｔｏ　Ｂ４．Ｂｉｌａｔｅｒａｌ　ｒｅｎａｌ　ｐｅｄｉｃｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｃｃｌｕｄｅｄ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｃｌａｍｐｓ　ｆｏｒ４５　ｍｉｎｕｔｅｓ．Ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｋｉｄｎｅｙｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｅｄ．Ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ　ａｔ　ｓｈａｍ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　２４　ｈ，４８　ｈ　ａｎｄ　７２　ｈ　ａｆｔｅｒ　ＩＢＩ．Ｓｅｒｕｍ　ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ（Ｓｃｒ），ｕｒｉｎｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｒｅｎａｌ　ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｓｐｌｅｎｉｃ　ＣＤ３　／ＣＤ４　／ＣＤ８　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ（ｇｒｏｕｐ　Ａ）　ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｓｃｒ　ａｎｄ　ｕｒｉｎｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｎｄ　ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｎｊｕｒｙ　Ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ａ２—４　ａｎｄ　Ｂ２—４．Ｔｈｅ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ａ　ｗｅｒｅ　ｍｏｒｅ　ｓｅｖｅｒｅ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｂ（Ｐ＜０．０５）．ＦＡＣＳ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｓｈｏｗｅｄ，ｔｈａｔ　ｉｎ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｗｉｈ　ｇｒｔｏｕｐ　Ａｌ，ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ｓｐｌｅｎｉｃ　ＣＤ３　Ｔ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ａ２　ａｎｄ　Ａ３　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５），ｂｕｔ　ａ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ＣＩＭ　／ＣＤ８’ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｒｏｕｐ　ＡＩ　ａｎｄ　ｇｒｏｕｐ　Ａ２—３（Ｐ夕０．０５））．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｐｌａｙ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ・ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ，ａｎｄ　ｍａｙ　ｍｅｄｉａｔｅ　ｐｏｓｔ・ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｄｅｃｌｉｎｅ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｌｅａｄ　ｔｏ　￣ｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｎｊｕｒｙ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ；Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ；Ｋｉｄｎｅｙ；Ｍｉｃｅ　肾缺血再灌注损伤（ＩＲＩ）是移植物不可避免的　损伤，是引起急性肾功能衰竭的重要因素之一，氧自　由基、ｃａ２　超载等是其发生的重要原因。本实验研　１材料和方法　１．１实验动物　究Ｔ淋巴细胞在ＩＲＩ导致的急性肾功能下降和组织　损害中发挥的作用。　雄性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠和ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠，合格证号：　ｓｃＳＫ（沪）２００４—０００２。体重约２０～２５　ｇ，鼠龄４～６　周，由中科院上海药研所提供。　１．２主要试剂和仪器　［作者简介】陈恕求（１９８０一），男，硕士研究生，研究方向：肾移　植。现工作单位：浙江省宁波市泌尿肾病医院泌尿外科（宁波市前　河路１号，３１５０００）。Ｅ・ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｓｈｕｑｉｕ＠　ａｉｌ．ＣＯｌ　美国ＢＤ公司：大鼠抗小鼠ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８单抗　及Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ　ＦＡＣＳ　Ｃａｌｉｂｕｒ自动分析仪；日本日　立公司：全自动生化分析仪。　维普资讯 http://www.cqvip.com ２２　中国实验动物学报２Ｏ０７年２月第１５卷第１期Ａｃｌａ　Ａｎｉｍ　Ｓｃｉ　Ｓｉｎ．Ｆｅｂ　２００＂／，Ｖ０１．１５　Ｎｏ．１　１．３实验方法　Ｉ．３．Ｉ动物分组和ＩＲＩ模型的建立：ＢＡＬＢ／ｃ小鼠和　ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠各２４只，分别随机按假手术对照组、　ＩＲＩ后２４　ｈ、４８　ｈ和７２　ｈ随机分成Ａ　组和ＢＨ组，　每组６只。氯胺酮１００～１２０　ｎ￣４ｋｇ腹腔注射麻醉，　取腹部正中切口，分别整体游离左右肾动静脉组织，　无损伤血管夹阻断肾蒂４５　ｒａｉｎ后恢复灌注，关闭切　口。　Ｉ．３．２标本检测项目：①肾功能Ａ组和Ｂ组小鼠　分别于假手术后即刻、ＩＲＩ后２４　ｈ、４８　ｈ和７２　ｈ取血　（活体腔静脉穿刺）和尿（膀胱穿刺），测Ｓｃｒ、尿蛋白定　量。②脾Ｔ淋巴细胞亚群流式细胞仪测Ａ组脾　ＣＤ３　、ＣＤ４　及ＣＤ８　Ｔ细胞比例。③组织学按上　述时间点取肾，中性甲醛固定，石蜡包埋、切片，分别　ＨＥ染色和ＰＡＳ染色（肾小管基底膜和刷状缘着色）。　组织损伤程度采用改良Ｒａｂｂ川和Ｓｏｌｅｚ法　积分系统　评分，半定量评估小管坏死程度，评分越高损害越重，＾Ｉ，Ｉｏ目３８∞　　０分：正常或基本正常肾组织；１分：＜５％肾组织受损　＾Ｉ害；２分：５％一２５％肾组织受损害；３分：２５％一７５％肾　组织受损害；４分：＞７５％肾组织受损害。　１．４统计学方法　结果以元±ｓ表示，组间比较采用ｔ检验，Ｐ＜　０．０５为差异有显著性。　２　结果　２．１肾功能改变　Ａ组和Ｂ组Ｓｃｒ水平均分别明显高于其对照组　（Ｐ＜０．０５）。Ｂ２和Ｂ］组Ｓｃｒ水平分别为（２４．１７±　４．０７）和（３２．０±８．１７）／ｚｍｏｌ／Ｌ，而Ａ　和Ａ］组分别为　（５２．３±１４．２９）和（４１．１７±７．３６）／ｚｍｏｌ／Ｌ，分别明显高　于Ｂ２组和Ｂ３（Ｐ＜０．０５），Ａ　与Ｂ　组间差异无显著　性（Ｐ＞０．０５）（图１）；Ａ２和　组尿蛋白定量分别为　（１５０８．８±９１）ｍｇ／Ｌ和（１５２８．１７±３３７．５７）ｍｇ／Ｌ，明显　高于Ａ１组（Ｐ＜０．０５），Ａ４与Ａ．组差异无显著性（Ｐ　＞０．０５），Ｂ２组尿蛋白定量为（１６９４．７±１９７．７）ＩＩｌｇ，Ｌ，　高于其Ｂ　组（１１８０．２±１６５．３）ｍｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０５），但　Ｂ］和Ｂ４组与Ｂ　组比较则差异无显著性（Ｐ＞　０．０５），Ａ　．　组尿蛋白定量与Ｂ　一　组比较，差异无显　著性（Ｐ＞０．０５）（图２）。　２．２脾Ｔ淋巴细胞亚群变化　Ｂ　组小鼠流式细胞仪检测证实脾Ｔ淋巴细胞　百分比平均２．３％，符合试验要求，且其余Ｂ组小鼠　不做脾Ｔ淋巴细胞亚群检测；Ａ２和Ａ１组ＣＤ３　Ｔ淋　ＩＲＩ后时间０１）　Ｈｏｍ　ａｎｅｒⅡＵ　图１　ＩＲＩ后Ｓｅｒ水平　．１　Ｓｅｒ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ＩＲＩ　Ａ组ｇｒｏｕｐＡ　Ｂ组ｇｒｏｕｐＢ　重　＊呈８ｕｇ０目　ｏｌ袭　嚣　ｄ　Ｑ口　噻　ＩＲＩ后时间（ｈ）　Ｈｏｕｒｓ　ａｆｔｅｒⅡＵ　图２　ＩＲＩ后尿蛋白水平　矾ｇ．２　Ｕｒｉｎｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ＩＲＩ　巴细胞百分比较Ａ　组升高，差异有显著性（Ｐ＜　０．０５），　组与Ａ．组比较差异无显著性（Ｐ＞０．５０），　而ＣＤ４　、ＣＤ８　Ｔ淋巴细胞百分比及ＣＤ４　／ＣＤ８　比　值均无显著变化，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）（表１）。　２．３肾组织学改变　Ａ　组和Ｂ　一　组均出现不同程度的小管上皮结　构破坏、刷状缘丢失、管型、管腔扩展，间质炎症水肿　（图３～５），ＰＡＳ染色下见Ａ　一　组均明显的肾小管刷　状缘丢失，而Ｂ　．　组结构破坏较少，刷状缘丢失少、　程度轻（图６～８）。Ａ组肾小管坏死评分分别为０、　１．１７±０．４１、１．３３±０．５２和１．８３±０．７５，明显高于Ｂ　组（图９）（Ｐ＜０．０５）。图３～８见彩插３。　３讨论　ＩＲＩ是临床肾移植过程中不可避免的损伤过程，　是急性肾小管坏死（ＡＴＮ）的主要原因之一　，是　ＤＧＦ发生的重要危险因素，并且影响移植物的远期　存活率　。ＩＲＩ的主要发生机制包括　：氧自由基　，嚣Ⅲ】ｇ—维普资讯 http://www.cqvip.com 中国实验动物学报２ＯＯ７年２月第１５卷第１期Ａｃｔａ　ｈｂ　Ａｎｉｍ　Ｓｃｉ　Ｓｉｎ．Ｆｅｂ　２ＯＯ７，Ｖｏ１．１５　Ｎ。．１　尔表　２　５　２　０　１　５　２３　瓤÷扯　ｌ　０　０　５　一８０旨－ｌｌｏＩ８口ＪＩ—ＩＩｑＩＩ－Ｌ　０　－－　注：与Ａ１组比较：　Ｐ＜Ｏ．ｏ５，▲Ｐ＞Ｏ．０５　Ａ　Ｂ　Ｎ０ｔｅ：ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｌｌ　ｇｍ“ｐ　Ａｌ：　Ｐ＜Ｏ．０５，▲Ｐ＞Ｏ．０５　Ｌ．　脚后时间（ｈ）　ＨｏｕｒｓａｆｔｅｒⅡＵ　注：Ａ与Ｂ组比较：Ｐ＜ｏ．０５　Ｎｏｔｃ：ｇｒｏ呷Ａ　ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｇｒｏ呷Ｂ：Ｐ（０ｌ０５　图９　Ａ组和Ｂ组小鼠ＩＲｌ后肾小管坏死评分　Ｆ　．９　ＴｕｂＩｌｌ　Ｈｅｃ￣ｓｉｓ　ｓｃｏｒｅ　ａｆｌｅｒ　ＩＲＩ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ａ　ａｎｄ　Ｂ　生成增多、ｃａ　超载、能量耗竭、代谢废物聚集、水电　解质平衡紊乱等。近年来研究表明，免疫因素在肾　ＩＲＩ过程中可能发挥重要作用　Ｊ。本试验中，野生型　小鼠ＩＲＩ后２４　ｈ及４８　ｈ的Ｓｃｒ水平明显高于裸小　鼠，而且尿蛋白定量裸小鼠在ＩＲＩ后４８　ｈ即与对照　组无显著差异，与野生型小鼠比较，肾功能损害程度　轻、恢复快；在组织学改变上，野生型小鼠出现明显　的肾ＩＲＩ病理损害表现，程度重、持续时间长，而裸　小鼠仅出现轻微的ＩＲＩ病理损害。可见，缺乏Ｔ淋　巴细胞对肾ＩＲＩ有一定的保护作用，Ｔ淋巴细胞在小　鼠肾ＩＢＩ中发挥重要作用。　Ｔ淋巴细胞经典的活化途径是抗原依赖性活　化，但是在肾ＩＲＩ中没有“外来”抗原的刺激，并且肾　ＩＲＩ后有Ｔ淋巴细胞的激活及Ｔ淋巴细胞相关的细　胞激酶表达上调　Ｊ，可见，肾ＩＲＩ可能是非抗原依　赖性激活Ｔ淋巴细胞。本试验中，Ａ组小鼠ＩＲＩ前　后的脾Ｔ淋巴细胞亚群变化显示，ＩＲＩ可以导致　ＣＤ３　Ｔ淋巴细胞的活化增殖，但ｃＤ４　／ＣＤ８　比值　无变化。研究表明，ＩＲＩ可引起趋化因子ＲＡＮ￣Ｓ表　达上调，并且ＲＡＮ￣Ｓ能介导Ｔ淋巴细胞活化增殖，　而不影响ＣＤ４　／ＣＤ８　比值　。肾缺血后细胞间　一一　　一　粘附分子．１（ＩＣＡＭ．１）表达上调，并且ＩＣＡＭ．１是淋巴　细胞活化的重要辅助因子¨　］。因此，ＩＲＩ后Ｔ淋巴　细胞可能是通过趋化因子ＲＡＮ￣Ｓ及ＩＣＡＭ．１等的　表达上调非抗原依赖性活化增殖，从而在肾Ｉｍ中　发挥重要。　肾ＩＲＩ能非抗原性激活Ｔ淋巴细胞，并导致肾　功能和组织损害，但是Ｔ淋巴细胞通过何种途径产　生作用尚不明确。Ｔ￣ａｄａ等报道　，通过ＣＴＬＡ４Ｉｇ　阻断ＣＤ２８与ＣＤ８０的结合可以在肾ＩＲＩ中发挥保护　作用，因此ＣＤ２８表达上调在肾ＩＲＩ中发挥重要作　用。肾ｍＩ后早期即有肿瘤坏死因子．ａ（ｒＩ’ＮＦ．ａ）、干　扰素．７（ＩＦＮ．７）的表达增高，并通过直接的细胞毒作　用和介导中性粒细胞导致组织损害　Ｊ。ＩＲＩ后活化　的Ｔ淋巴细胞在组织外或组织内部表达、分泌多种　可溶性细胞因子，这些细胞因子通过进一步活化Ｔ　淋巴细胞或通过间接、直接的方式发挥组织损害作　用。　本试验结果提示，Ｔ淋巴细胞是介导小鼠肾ＩＲＩ　引起的急性肾损害的重要因素，因此，可通过阻断Ｔ　淋巴细胞的非抗原依赖性活化（抗氧化剂等）及抗细　胞因子抗体（抗．ＴＮＦ．ａ、抗．ＩＦＮ．７等）预防和减轻ＩＲＩ　引起的移植物早期的功能损伤，减少Ａ１＇Ｎ的发生机　率，提高移植物存活率。　（本文图３—８见彩插３。）　参　考　文　献　Ｒａｂｂ　Ｈ，Ｍｅｎｄｉｄａ　ＣＣ，Ｓａｂａ　ＳＲ，ｅｔ　ａ１．ＡｎＩｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ＩＣＡＭ—ｌ　ｐｒ０Ｉｅｃｔ　ｋｉｄｎｅ￣ｉｎ　ｓｅｖｅｒｅ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ￣ｓｉｏｎ　ｉｎｊ“ｒｙ［Ｊ］．Ｂｉ￣ｈｅｍ　Ｂｉｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃ０ＩＴＩＩＩｌ，ｌ９９５，２１１（１）：６７—７３．　ｓｏｌｅｚ　Ｋ，Ｍａｒｏｇｅｒ　Ｍ，Ｓｒａｅｒ　ＪＤ．１１１ｅ　ｍ０ｒｐｈｏｌｏ　ｏｆ　ａｃｕｔｅ　ｔＩｌｂｌｌｌａｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｉｎ　ｎ哪：ａＴＩａｌｙｓｉｓ　０ｆ　５７　ｒｅｒＩａｌ　ｂｉ０ｐＢｉｅｓ　ａＴｌｄ　ａ　ｃｏｍｍｏｎ　ｗ　ｔｌｌｅ　ｇｌｙｃｅｒＤｌ　ｍｏｄｄ［Ｊ］．Ｍ￣ｉｅｉｎｅ，１９７９，５Ｓ（５）：３６２—３７６．　吕忠，朱有华．移植物功能延迟恢复的研究现状［Ｊ］．国外医　学・泌尿系统分册，２００ｌ４，２４（４）：４８９—４９２．　ＶａＴｌ　Ｅｓ　Ａ，Ｈｅｒｍａｎｓ　Ｊ，ＶａＴｌ　Ｂｏｃｋｄ　ＪＨ．ｅｔ　ａ１．Ｅ　ｔ　０ｆ　ｗ蚰　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ＨＬＡ（Ａ　ａＩｌｄ　Ｂ）“　ｃｈ　ｏｎⅢ１ａｌ　ｃａｄａｖ￣ｃ　ｇｒａｆｔ　Ｂｕｎｒｉｖａｌ　ａｎｄ　６０ｎ　ｅｐｉ∞ｄｅ８［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉ￣，１９８３（３），３６：　维普资讯 http://www.cqvip.com ２４　中国实验动物学报２００７年２月第ｌ５卷第１期Ａｃｔａ　Ｌａｂ　Ａｎｉｔａ　Ｓｃｉ　Ｓｉｎ．Ｆｅｂ　２ＯＯ７，Ｖｏ１．１５　Ｎ０．１　、　￥　ｌ　科技动态Ｉ５　扮　；；、　流行性和动物源性刺突蛋白变异重组ＳＡＲＳ．ＣｏＶ　攻毒老龄鼠检验疫苗有效性　２００３年，ＳＡＲＳ—ＣｏＶ被确认为重症急性呼吸综合征（ＳＡＲＳ）的病原体，ＳＡＲＳ疾病的发病特点是重症肺炎，　病死率高。ＳＡＲＳ．ＣｏＶ是一种动物源性病毒，能够通过物种间屏障传播。该病毒可能来源于蝙蝠或其它物　种，包括果子狸、浣熊、家猫、猪或啮齿类动物。　美国北卡大学微生物和免疫系的Ｄｅｍｉｎｇ　Ｄ等人基于以上观点，开发了一种具有长效保护作用的ＳＡＲＳ．　ＣｏＶ疫苗，尤其对一些易感的老年人群有效，并且可以同时防治在２００３年人类传播的ＳＡＲＳ病毒株和动物源　性ＳＡＲＳ病毒株。作者报道了在青年鼠和老龄鼠中检验ＳＡＲＳ疫苗有效性的结果。该疫苗使用委内瑞拉马　脑炎病毒复制子（ＶＲＰ）表达２００３年人类传播的Ｕｒｂａｎｉ　ＳＡＲＳ—ＣｏＶ病毒株刺突糖蛋白（ＶＲＰ－Ｓ）或核蛋白（ＶＲＰ．　Ｎ）制成。实验证实ＶＲＰ．Ｓ疫苗能够在青年鼠和老龄鼠中产生完整的短期、长期的保护作用，而ＶＲＰ．Ｎ则不　能。为了检测ＶＲＰ疫苗的抵抗非同源ＳＡＲＳ．ＣｏＶ病毒株的有效性，作者使用了系统发生树分析、生物合成和　反转录等方法构建了重组病毒编码ｓ糖蛋白基因（ｉｃＧＤＯ３．Ｓ）。ＧＤＯ３基因簇为动物源性ＳＡＲＳ．ｃ０Ｖ，是高度　遗传变异的人类ＳＡＲＳ病毒株。ｉｃＧＤ０３一Ｓ在青年鼠和老龄鼠的气管和肺脏上皮细胞内复制，对Ｕｒｂａｎｉ病毒　株的中和抗体血清有较强的抵抗作用。ＶＲＰ．Ｓ疫苗免疫青年鼠后对异源ｉｃＧＤ０３．Ｓ攻毒有完整的短期保护作　用，而对疫苗免疫的老龄鼠保护作用则有限。ＶＲＰ—Ｎ疫苗不但对同源或异源的病毒攻击没有保护作用，而且　ＳＡＲＳ．ＣｏＶ攻毒后鼠肺部免疫反应增强，嗜伊红细胞浸润明显。ＶＲＰ．Ｎ介导的病理学改变在第４天出现，第７　天左右达到高峰，持续到第ｌ４天。该病变由细胞免疫反应引起。　作者指出，这项研究为将来ＳＡＲＳ．ＣｏＶ人兽共患病防治中的疫苗设计提供了参考，尤其对老年人群易感　的病毒。携带异源ｓ糖蛋白的ＳＡＲＳ．ＣｏＶ病毒可以用于评价针对动物源性病毒株疫苗的有效性研究，动物　源性ＳＡＲＳ病毒株是未来人类ＳＡＲＳ再次爆发流行的隐患。　孔琪，译自ＰＩ　Ｍｅｄ．　维普资讯 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陈恕求．等：Ｔ淋巴细胞在小鼠肾缺血再灌注损伤中的作用　Ｉ全文见２１页　ＣＨＥＮ　Ｓｈｕ　ｑｉＬＩ　ｅｒ　ａｌ：Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ　Ｒｏｌｅ　ｏｆＴ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　Ｒｅｎ￣Ｉ［ｓｃｈｅｍｉａ－Ｒｅｐｅｒ￣ｈｓｉｏｎ　ｌｎｉｍｙ　ｉｎ　Ｍｉｃｅ　（Ｆｕｌｌ　ｈ　ｘ　Ｌ　０　ｐａｇｅ　２　囤７　Ａ３娘肾小暂站树畦坏明显．大量刷牡缘壬戋（箭　头１　ＰＡＳ　ｘ４００）　Ｆｉｇ．７　Ｇｒｏｕｐ　Ａ３　…ｔｕｂｕｌａｒ　ｄａｍａｇｅ　Ｔｈｅ　ｔｕｂｕｌ￣　目８　Ｂ３蛆：小管结构基啦正常　＊）（ＰＡＳ　ｘ４００、　Ｆｉｇ．Ｓ　Ｇｒｏｕｐ　Ｂ３　ａｌｍｏｓｔ…ｍ刚状蜷破坏（箭　ａ１　ｔｕｂｕｌａｒ　ｍ　ｗｉｔｈ　ｂｒｕｓｈ　ｂｏｒｄｅｒ　ｗａｓ　ｌｏｓｔ【一ｗ）（ＰＡＳ　ｘ４００１　ｏｍｌｙ　ｓｌｉｇｈｔ　ｂｒａｓｈ　ｂｏｒｄｅｒ　ｄａｌｍｇｅ　ｌａｒｒｏｗ）（ＰＡＳ．￣４００）　ｈ