一种从金莲花中提取荭草苷的方法[发明专利]

*CN101973983A*

(10)申请公布号 CN 101973983 A(43)申请公布日 2011.02.16

(12)发明专利申请

(21)申请号 201010235742.4(22)申请日 2010.07.26

(71)申请人南京泽朗农业发展有限公司

地址211225 江苏省南京市溧水县白马镇工

业集中区(72)发明人苏刘花(51)Int.Cl.

C07D 407/04(2006.01)

权利要求书 1 页 说明书 3 页

(54)发明名称

一种从金莲花中提取荭草苷的方法(57)摘要

本发明涉及一种从金莲花中提取荭草苷的方法，工艺是以金莲花为原料，乙醇加热提取，提取液回收乙醇，浸膏加pH2-5酸性水溶解滤过，加入大孔树脂树脂柱吸附，40-60％乙醇洗脱，洗脱液浓缩加乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩拌硅胶烘干装入中压硅胶柱，氯仿甲醇洗脱，洗脱液浓缩再结晶，干燥即得产品。本工艺操作简单，分离纯化周期短，处理量大，成本低，产品含量高，适合小规模工业化生产。

CN 101973983 ACN 101973983 ACN 101973987 A

权 利 要 求 书

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1.一种从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于包含以下步骤：

1)提取：把金莲花原料粉碎加入10-20倍量80-95％乙醇溶液加热提取1-2小时，提取2-3次，合并提取液；

2)大孔树脂富集：上述提取液减压回收乙醇至浸膏状加水ph3-5的酸性水溶解，滤出不溶物，滤液加入大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用4-7BV40-60％乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液；

3)浓缩萃取：将上述洗脱液加入减压浓缩，浓缩液加入乙酸乙酯萃取2-3次，得萃取液；

4)中压硅胶柱分离：将上述萃取液减压回收乙酸乙酯加入硅胶拌样烘干，装入中压硅胶柱，氯仿甲醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集荭草苷高浓度流分，回收试剂，加入洗脱剂回流溶解，冷藏结晶，结晶物真空干燥即得荭草苷。

2.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤1)中的提取温度控制在50-70℃。

3.如权利要求1所述从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤2)中的酸为盐酸、硫酸或磷酸的一种，大孔树脂型号可选HZ816、D101、SPD100、AB-8中的一种。

4.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的中压硅胶柱为直径为10-30cm，径高比1∶15-20，压力0.8-1.2Mpa.，硅胶选200-300目硅胶。

5.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的氯仿甲醇洗脱为：10-20BV氯仿甲醇(20∶1-3)→氯仿甲醇(15∶4)。

6.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的结晶溶剂为氯仿甲醇(15∶4)混合溶液。

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说 明 书

一种从金莲花中提取荭草苷的方法

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技术领域：

[0001] 本发明涉及一种从金莲花中提取荭草苷的方法，特别是涉及一种采用大孔树脂和中压硅胶柱分离荭草苷的方法。

背景技术：

[0002] 荭草苷，荭草素；2-(3，4-二羟基苯基)-8-BETA-D-吡喃葡萄糖基-5，7-二羟基-4H-1-苯并吡喃-4-酮。[0003] 分子式：C21H20O11；[0004] 分子量：448.38[0005] 理化性质：熔点260-285℃，可溶于水、乙醇，略溶于丙酮、正丁醇、乙酸乙酯等，不溶于氯仿、乙醚、石油醚等非极性溶剂。[0006] 荭草苷广泛存在于植物中，尤其是金莲花最高，含量高达2％。荭草苷具有杀菌、抗病毒作用，并具有抗氧化性。[0007] 目前，荭草苷提取工艺主要是色谱分离法，部分文献：

[0008] 中国专利(申请号200610041165)“一种乌蕨荭草苷和牡荆素提取纯化方法”，该工艺采用反向硅胶柱分离，该方法处理量小，成本高。

[0009] 中国专利(申请号CN200410093126.4)“短瓣金莲花总黄酮和几种高纯度药用物质的制备工艺”，该种方法采用逆流色谱制备，制备量小。

[0010] 中国专利(申请号CN200710121800.9)“荭草苷标准品的制备方法”，该专利采用凝胶柱分离，制备较小。

[0011] 此外还有文献李德强发表的“金莲花有效成分的提取分离和药动学研究”，该文献采用常压硅胶柱分离，周期较长。发明内容：

[0012] 本发明的目的是为了克服上述现有技术的缺陷及不足，提供一种处理量较大、成本低的荭草苷提取方法。

[0013] 本发明的技术解决方案是：

[0014] 一种从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于包含以下步骤：[0015] 1)提取：把金莲花原料粉碎加入10-20倍量80-95％乙醇溶液加热提取1-2小时，提取2-3次，合并提取液；[0016] 2)大孔树脂富集：上述提取液减压回收乙醇至浸膏状加水ph3-5的酸性水溶解，滤出不溶物，滤液加入大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用4-7BV40-60％乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液；[0017] 3)浓缩萃取：将上述洗脱液加入减压浓缩，浓缩液加入乙酸乙酯萃取2-3次，得萃取液；

[0018] 4)中压硅胶柱分离：将上述萃取液减压回收乙酸乙酯加入硅胶拌样烘干，装入中

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说 明 书

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压硅胶柱，氯仿甲醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集荭草苷高浓度流分，回收试剂，加入洗脱剂回流溶解，冷藏结晶，结晶物真空干燥即得荭草苷。[0019] 所述步骤1)中的提取温度控制在50-70℃。[0020] 所述步骤2)中的酸为盐酸、硫酸或磷酸的一种，大孔树脂型号可选HZ816、D101、SPD100、AB-8中的一种。

[0021] 所述步骤4)中的中压硅胶柱为直径为10-50cm，径高比1∶15-20，压力0.8-1.2Mpa.，硅胶选200-300目硅胶。

[0022] 所述步骤4)中的氯仿甲醇洗脱为：10-20BV氯仿甲醇(20∶1-3)→氯仿甲醇(15∶4)。

[0023] 所述步骤4)中的结晶溶剂为氯仿甲醇(15∶4)混合溶液。[0024] 本发明的优点是：金莲花为原料，高浓度乙醇提取减少了多糖蛋白的溶出；酸性水分散，可除去非水溶性黄酮，利于大孔树脂富集；后段乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯用量少；中压硅胶柱可选粒度细的硅胶分离度好，加压洗脱处理速度快。[0025] 下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式：

具体实施方式：[0026] 实施例1：[0027] 金莲花粉碎，称取1kg加入小型不锈钢提取罐，再加入10L80％乙醇加热70℃，提取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph3的盐酸水溶液溶解充分溶解，滤去不溶物，滤液加入700mlHZ816大孔树脂柱吸附，流速不超过1L/h，吸附结束后先水洗至糖反应呈阴性，再用4.9L40％乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加入3BV乙酸乙酯萃取3次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新硅胶1∶10装入中压柱(直径为10cm，径高比1∶20)，先用10BV氯仿甲醇(20∶3)洗脱杂质，再用氯仿甲醇(15∶4)荭草苷，压力控制0.8-1.2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分回收试剂，再用氯仿甲醇(15∶4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干燥得到50g荭草苷，含量98％。[0028] 实施例2：[0029] 金莲花粉碎，称取1kg加入小型不锈钢提取罐，再加入10L90％乙醇加热60℃，提取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph5的硫酸水溶液溶解充分溶解，滤去不溶物，滤液加入800mlD101大孔树脂柱吸附，流速不超过900ml/h，吸附结束后先水洗至糖反应呈阴性，再用4.8L50％乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加入2BV乙酸乙酯萃取4次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新硅胶1∶15装入中压柱(直径为10cm，径高比1∶15)，先用15BV氯仿甲醇(10∶1)洗脱杂质，再用氯仿甲醇(15∶4)荭草苷，压力控制0.8-1.2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分回收试剂，再用氯仿甲醇(15∶4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干燥得到52.5g荭草苷，含量98.5％。[0030] 实施例3：[0031] 金莲花粉碎，称取1kg加入小型不锈钢提取罐，再加入10L95％乙醇加热50℃，提

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说 明 书

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取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇全浸膏状，加入ph4的磷酸水溶液溶解充分溶解，滤去不溶物，滤液加入800ml SPD100大孔树脂柱吸附，流速不超过1L/h，吸附结束后先水洗至糖反应呈阴性，再用3.2L60％乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加入等体积乙酸乙酯萃取5次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新硅胶1∶20装入中压柱(直径为10cm，径高比1∶20)，先用20BV氯仿甲醇(20∶1)洗脱杂质，再用氯仿甲醇(15∶4)荭草苷，压力控制0.8-1.2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分回收试剂，再用氯仿甲醇(15∶4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干燥得到47g荭草苷，含量99％。[0032] 实施例4：[0033] 金莲花粉碎，称取5kg加入小型不锈钢提取罐，再加入15L90％乙醇加热60℃，提取2小时，提取2次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph5的盐酸水溶液溶解充分溶解，滤去不溶物，滤液加入3.5L AB-8大孔树脂柱吸附，流速不超过5L/h，吸附结束后先水洗至糖反应呈阴性，再用21L50％乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加入3BV乙酸乙酯萃取3次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新硅胶1∶15装入中压柱(直径为20cm，径高比1∶20)，先用15BV氯仿甲醇(20∶3)洗脱杂质，再用氯仿甲醇(15∶4)荭草苷，压力控制0.8-1.2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分回收试剂，再用氯仿甲醇(15∶4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干燥得到240g荭草苷，含量98.2％。[0034] 实施例5：[0035] 金莲花粉碎，称取10kg加入小型不锈钢提取罐，再加入100L85％乙醇加热60℃，提取2小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph4的盐酸水溶液溶解充分溶解，滤去不溶物，滤液加入7LHZ816大孔树脂柱吸附，流速不超过7L/h，吸附结束后先水洗至糖反应呈阴性，再用35L60％乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加入2BV乙酸乙酯萃取4次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新硅胶1：20装入中压柱(直径为30cm，径高比1∶20)，先用15BV氯仿甲醇(20∶3)洗脱杂质，再用氯仿甲醇(15∶4)荭草苷，压力控制0.8-1.2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分回收试剂，再用氯仿甲醇(15∶4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干燥得到490g荭草苷，含量98％。

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