黄芩苷对UVB照射后小鼠皮肤光损伤的影响

８４　中国美容医学２０１２年１月第２ｌ卷第１期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｅｓｔｈｅｔｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊａｎ．２０１２．Ｖｏ１．２１．Ｎｏ．１　・论著・　黄芩苷对ＵＶＢ照射后小鼠皮肤光损伤的影响　许阳，周炳荣，吴迪，骆丹　（南京医科大学第一附属医院皮肤科江苏南京２１　００２９）　［摘要］目的：观察黄芩苷对ＵＶＢ照射后小鼠皮肤中光损伤的影响。方法：将黄芩苷外搽于Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠皮肤，检测１８ＯｍＪ／ｃｍ２　ＵＶＢ　照射后２４ｈ小鼠皮肤红斑、水肿、细胞增生、真皮炎症细胞浸润情况　结果：无论是ＵＶＢ照射前还是照射后外用黄芩苷均明显减　轻紫外线照射造成的小鼠皮肤红斑、皮肤水肿，细胞增殖和炎症细胞浸润。结论：黄芩苷可抵抗ＵＶＢ诱导的小鼠皮肤红斑水肿反　应，并通过减少炎症细胞浸润而发挥抗炎作用。　［关键词］黄芩苷；中波紫外线；光损伤　［中图分类号］Ｒ３３２　［文献标识码］Ａ［文章编号］１　００８—６４５５（２０１２）０１—００８４一Ｏ３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｂａｉｃａｌｉｎ　ｏｎ　ＵＶＢ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｐｈｏｔｏ　ｄａｍａｇｅｓ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｓｋｉｎ　ＸＵ　Ｙａｎｇ，ＺＨＯＵ　Ｂｉｎｇ—ｒｏｎｇ，ＷＵ　Ｄｉ，ＬＵＯ　Ｄａｎ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１　００２９，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｉｒｌ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ．ｗｅ　ａｓｓｅｓｓｅｄ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｂａｉｃａｌｉｎ　ｏｎ　ＵＶＢ—ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｄａｍａｇｅｓ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｓｋｉｎ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａ　ｐｈｏｔｏ—ｄａｍａｇｅｄ　ｍｏｕｓｅ　ｍｏｄｅｌ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｙ　ＵＶＢ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｓｋｉｎ　ｅｒｙｔｈｅｍａ　ａｎｄ　ｅｄｅｍａ　ｗｅｒｅ　ａｓｓｅｓｓｅｄ．ＨＥ　ｓｔａｉｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｏｕｒ　ｄａｔａ　ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ａ　ｔｏｐｉｃａｌ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂａｉｃａｌｉｎ，　ｅｉｔｈｅｒ　ｐｒｅ—ｏｒ　ｐｏｓｔ—ＵＶＢ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ．ｒｅｓｕｌｔｅｄ　ｉｎ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｉｎ　ＵＶＢ—ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ｊｎ　ｓｋｉｎ　ｅｄｅｍａ．ｓｋｉｎ　ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ　ａｎｄ　ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｉｓ　ｄａｔａ，ｗｅ　ｓｕｇｇｅｓｔ　ｔｈａｔ　ｂａｉｃａｌｉｎ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ａｓ　ａｎ　ａｇｅｎｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｅｌｉｃｉｔｅｄ　ｂｙ　ＵＶ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｓｋｉｎ　ｃａｎｃｅｒ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｂａｉｃａｌｉｎ；ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　Ｂ：ｐｈｏｔｏｄａｍａｇｅ　紫外线，尤其是波长为２９０￣３２０ｎｍ的中波紫外线　（ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　Ｂ，ＵＶＢ）可导致诸多光源性皮肤损伤，如红　斑、水肿、色素沉着、异常增生、光老化、光化性角化病以及皮肤　度；￣ＵＶＢ剂量１８０ｍＪ／ｃｍ　＝ＵＶＢ辐照度×时间（ｓ）。　１．２．２动物实验处理：ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分组，每组５只：空白　对照组、丙酮溶液组、黄芩苷组、ＵＶＢ组、黄芩苷＋ＵＶＢ组和　肿瘤等。中药提取物防治皮肤光损伤的研究已有不少报道　。黄　芪是我国常用的中药之一，其中的主要活性成分黄芩苷　（Ｂａｉｃａｌｉｎ）有着广泛的生物学效应，如抗炎、抗氧化及抗肿　ＵＶＢ＋黄芩苷组。小鼠背部皮肤接受１８０ｍＪ／ｃｍ。ＵＶＢ照射。黄　芩苷＋ＵＶＢ组照光前２４ｈ预先局部外用相应药物，ＵＶＢ＋黄芩　苷组中为照光后局部外用相应药物，１０ｍｇ／ｍＬ的黄芩苷给药　剂量为每平方厘米皮肤外用ｌｍｇ黄芩苷（即ｌｍｇ／ｃｍ　）。接受　照射２４ｈ后处死动物取背部皮肤行后续实验。　１．２．３肉眼观察小鼠背部红斑：肉眼观察每只小鼠背部红斑　瘤等作用。已有研究在体外实验中证实了黄芩苷有着多方面　的抗光损伤作用。然而，是否黄芩苷可在体内实验中减少因　照射ＵＶＢ而造成的光产物，继而减轻诸多光损伤表现尚未见　有报道。本实验拟将黄芩苷外搽于Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠皮肤，观察　生成情况，并用数码相机拍照记录。　１８０ｍＪ／ｃｍ。ＵＶＢ照射后２４ｈ小鼠皮肤红斑、水肿、细胞增生、　１．２．４游标卡尺检Ｎ４，鼠背部皮褶厚度用游标卡尺测量小　鼠背部皮褶厚度并记录数据，每只小鼠取背部不同皮肤部位　８处进行重复测量。　真皮炎症细胞浸润情况，为进一步研究黄芩苷发挥抗光损伤　作用的确切机制奠定基础。　１材料和方法　１．１材料　１．ｉ．Ｉ试剂：黄芩苷购自美国Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ公司，以丙酮稀　释为１０ｍｇ／ｍｌ的溶液备用。　１．２．５　ＨＥ染色检测病理变化：颈椎脱臼法处死动物，立即剪　取小鼠背部皮肤，经固定、包埋、切片后，苏木素～伊红常规　染色镜下观察。　１．２．６数据统计分析以ＳＰＳＳ１　１．０统计软件对实验数据进　行单因素方差检验，当Ｐ＜Ｏ．０５时认为差异有统计学意义。　２结果　ｉ．１．２实验动物：无毛ＢＡＬＢ／ｅ小鼠，共３Ｏ只，雌性，１２～１４　周，２０ｇ左右，购自南京大学模式动物中心。　１．２方法　２．１不同处理组小鼠皮肤肉眼改变：１８０ｍＪ／ｃｍ　ＵＶＢ急性照　射后２４ｈ小鼠背部皮肤红斑较明显（图１）；ＵＶＢ照射前应用　黄芩苷预处理可减轻ＵＶＢ引起的红斑。　１．２．１　ＵＶＢ剂量的测算：①应用上海ＳＩＧＭＡ高技术有限公司　ＵＶＢ辐照度监示器标定ｓｕＶ一１００日光紫外线模拟器的辐照　项目资助：国家自然科学基金（Ｎｏ　８１０００７００；３０７７１９４６）　通讯作者：骆丹，女，教授，主任医师，博导，南京医科大学第一附属医院皮肤科主任，主要研究方向为光损伤及中药成分的光保护机制　Ｅ－ｍａｉ　ｌ：ｄａｎｉ　ｌｕｏ２０Ｏ５＠ｙａｈｏ０．ｃｏｍ．Ｏｎ　８６　巾国美容医学２０１２年１月第２ｌ卷第１期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｅｓｔｈｅｔｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊａｎ．２０１２．Ｖｏ１．２１．Ｎ０．１　作为衡量ＵＶＢ照射引起相应生物学效应的相关指标跚。黄芩　苷的光保护作用不仅表现在可以减轻ＵＶＢ照射后的红斑及　５８＿６’７．　［４］Ｍｉｄｄｅｌｋａｍｐ—Ｈｕｐ　ＭＡ，Ｐａｔｈａｋ　ＭＡ，Ｐａｒｒａｄｏ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｏｒａｌ　Ｐｏｌｙｐｏｄｉｕｍ　ｌｅｕｃｏｔｏｍｏｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｄｅｃｒｅａｓｅｓ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｄａｍａｇｅ　水肿程度，在镜下同样表现在能减少ＵＶＢ引起的上皮过度增　殖增生，减轻ＵＶＢ介导的早期皮肤炎症改变。ＵＶＢ照射有一定　的促细胞增殖作用，这也是ＵＶＢ照射引起皮肤肿瘤产生的可　ｏｆｈｕｍａｎ　ｓｋｉｎ［Ｊ］．ＪＡｍＡｃａｄＤｅｒｍａｔｏｌ，２００４，５ｌ：９１０—９１８．　［５］Ｈａｌｌｉｄａｙ　ＧＭ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ｇｅｎｅ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｈｏｔｏｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐ　ｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　ＵＶＲ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｄａｍａｇｅ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ　ｔｏ　能机制之一，黄芩苷处理后皮肤增生程度明显减轻从而降低　肿瘤发生的风险。　３．３紫外线诱导的皮肤氧化损伤是造成一系列皮肤损伤，包括　ｐｈｏｔｏｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｍｕｔａｔ　Ｒｅｓ，２００５，５７ｌ：１０７—１２０．　［６］Ｗｅｎｋ　Ｊ，Ｂｒｅｎｎｅｉｓｅｎ　Ｐ，Ｍｅｅｗｅｓ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．ｕＶ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ　ｐｈｏｔｏａｇｉｎｇ．Ｃｕｒｒ　Ｐｒｏｂｌ　Ｄｅｒｍａｔｏｌ，２００１，２９：８３－９４．　免疫抑制、炎症浸润、皮肤癌及皮肤老化在内的重要因素　。已　有研究证实黄芩苷具有抗氧化作用［７－１ｏ］。有研究表明，ＵＶＢ照　［７］Ｓｈｉｅｈ　ＤＥ，Ｌｉｕ　ＬＴ，Ｌｉｎ　ＣＣ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｎｄ　ｆｌｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆｂａｉｃａｌｅｉｎ，ｂａｉｃａｌｉｎ　ａｎｄ　ｗｏｇｏｎｉｎ［Ｊ］．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２０００，２０：　２８６１—２８６５．　射诱导的皮肤真皮浸润细胞增多可造成额外的氧化压力，进　一步加重皮肤损伤“　。由此可见，黄芩苷减轻紫外线诱导炎　总之，黄芩苷可抵抗ＵＶＢ诱导的红斑反应，减轻皮肤水　［８］Ｎｇ　ＴＢ，Ｌｉｕ　Ｆ，Ｗａｎｇ　ＺＴ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｒｆｏｍ　ｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉ，２０００，６６：７０９—７２３．　［９］Ｓｈｉ　Ｈ，Ｚｈａｏ　Ｂ，Ｘｉｎ　Ｗ．Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆｂａｉｃａｌｉｎ　ｏｎ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｆｒｏｍ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｉｎｊｕｒｙ　［Ｊ］＿Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ　Ｉｎｔ，１９９５，３５：９８ｌ・９９４．　症细胞浸润的特性可在一定程度上加强其抗氧化作用。　肿，减少炎症细胞浸润，但其抗炎、抗氧化作用的具体机制仍　需进一步研究。　［参考文献］　［１］Ｚｈｏｕ　ＢＲ，Ｌｕｏ　Ｄ，Ｗｅｉ　ＦＤ，ｅｔ　ａ１．Ｂａｉｃａｌｉｎ　ｐｒｏｔｅｃｔｓ　ｈｕｍａｎ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　Ｂ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｃｙｃｌｏｂｕｔｎｅ　ｐｙｒｉａｍｉｄｉｎｅ　ｄｉｍｅｒｓ　［１０］Ｋｉｍｕｙａ　Ｙ，Ｋｕｂｏ　Ｍ，Ｔａｎｉ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｅ　Ｒａｄｉｘ．ＩＶ．　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｌｉｐｉｄ　ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｌｉｖｅｒ［Ｊ１．Ｃｈｅｍ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌｌ　（Ｔｏｋｙｏ），１９８１，２９：２６１０—２６１７．　［１　１］Ｋａｔｉｙａｒ　ＳＫ，Ｍｕｋｈｔａｒ　Ｈ．　Ｇｒｅｅｎ　ｔｅａ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ　（－）　－・ｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｄｅｒｍａｔｏｌ　Ｒｅｓ，２００８，３００：３３　１—３３４．　［２】林向飞，闵伟，蔡宝祥，等．中波紫外线照射对人原代角质形成细胞　ＸＰＡ和ＥＲＣＣ１蛋白表达的影响以及ＥＧＣＧ的干预作用［Ｊ］．中国　ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ－－３－・ｇａｌｌａｔｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｔｏ　ｍｏｕｓｅ　ｓｋｉｎ　ｐｒｅｖｅｎｔｓ　ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ，ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ　ｏｆ　ＬｒＶＢ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｎｔｉｇｅｎ－ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ　ｃｅｌｌｓ，ａｎｄ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｌｅｕｋｏｃ　Ｂｉｏｌ，　２００１．６９：７１９—７２６．　美容医学，２００９，１８（１０）：１４６０—１４６４．　［３１Ｇｏｅｔｔｓｃｈ　Ｗ，Ｇａｒｓｓｅｎ　Ｊ，ｄｅ　Ｇｍｉｊｌ　ＦＲ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ　ｏｆ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ａｎｉｍａｌｓ　ｔｏ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｒａｄｉａｔｉｏｎ［Ｊ］＿Ｌａｂ　Ａｎｉｍ，１９９９，３３：　［收稿日期１２０１　１－０９—１０　［修回日期］２０１　１－１　１－２６　编辑／张惠娟　２０１　２全国中西医结合皮肤性病学术年会征文通知　经中国中西医结合学会批准，中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会定于２　０１２年４月１　２～１　６日在南京市钟山宾馆召　开２０１　２全国中西医结合皮肤性病学术年会。此次会议将发扬历次年会的优良传统，注重中西医结合治疗皮肤病的新方法及　新的研究进展等方面的学术交流，内容密切联系　临床，切合皮肤科医师的实际需求，会议将邀请知名专家做特邀演讲，阐述　皮肤科相关领域的最新研究进展，创造形式多样、内容充实、紧张热烈、活跃互动的学术交流形式，达到全国皮肤科中医、西　医、中西医结合医师共同展现才华、获取知识和信息、增强友谊和情感的目的，共同促经我国皮肤科事业的发展。拟参加本　次会议者请仔细阅读本通知并按规定的时间和要求投稿。　一投稿要求　１．投稿内容：皮肤科各种基础研究论文、皮肤科－临床诊断和治疗等方面的论丈、典型与疑难病例等。　２．投稿方式：中文全丈和４００字以内的中文摘要。鼓励通过电子邮件投稿，投稿信箱：ｐｆｋｘｈ＠１２６．ｃｏｍ。来稿请注明　２　０１２会议征文。　３．截稿日期：２０１　２年３月８日。　４．会议交流形式：特邀讲演、大会发言、分会发言、书面交流。　二联系方式　地址：上海市凤阳路４１　５号上海长征医院门诊部皮肤科，邮编：２　００００３　Ｅ－ｍａｉ　ｌ：ｐｆｋｘｈ＠ｌ２６．ｃｏｍ　联系人：朱和平，联系电话：Ｏ２卜８１８８　５４９８，手机：１　３６　７１　８１６１　５　中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会