液相色谱-串联质谱法检测鸡肉中7种糖皮质激素残留量

４２　福建分析测试Ｆｕｊｉａｎ　Ａｎａｌｙｓｉｓ＆Ｔｅｓｔｉｎｇ　液相色谱一串联质谱法检测鸡肉中７种糖皮质激素残留量　徐佳　福州３５００１５）　（福建中检华日食品安全检测有限公司，福建摘要：建立鸡肉中糖皮质激素多残留的液相色谱一串联质谱分析方法。样品经乙酸乙酯提取，正己烷净化，１０％乙　腈水定容后供高效液相色谱一串联质谱仪（ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ）分析，采用Ｃ。　色谱柱分离，电喷雾离子化负离子方式（ＥＳＩ一）　及多反应监测模式（ＭＲＭ）进行测定，外标法定量。研究了仪器条件、提取溶剂、净化溶剂等条件对七种目标物分离　状况的影响。在优化条件下，该方法在鸡肉样品中泼尼松的的线性范围为０．５～２０　ｔｘｇ／Ｌ，泼尼松龙、甲基泼尼松、地　塞米松、氢化可的松、倍氯米松、氢化可的松乙酸盐的浓度范围为Ｏ．１—２０　Ｉｘｇ／Ｌ，在加标水平１．０—１０￣ｇ／ｋｇ范围内，　回收率为８３％～１０４．２％；相对标准偏差为０．９２％～４．８９％。　关键词：液相色谱一串联质谱法；糖皮质激素；鸡肉　中图分类号：０６５７．６３文献标识码：Ａ文章编号：１００９—８１４３（２０１５）０２—００４２—０６　Ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－８１４３．２０１５．０２．１０　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＧｌｕｃＯｃｏｒｔｉｃＯｉｄｓ　Ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｃｋｅｎ　Ｔｉｓｓｕｅｓ　ｂｙ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｔａｎｄｅｍ　Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　ＸｕＪｉａ　（Ｆｕｊｉａｎ　ＣＣＩＣ—Ｆａｉｒｒｅａｃｈ　Ｆｏｏｄ　Ｓａｆｅｔｙ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　Ｃｏ．，Ｌｔｄ；Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ　３５００１５，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｓｅｖｅｎ　ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｉｎ　ｃｈｉｃｋｅｎ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｂｙ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—　ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　ｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ．Ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ．Ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｎ—ｈｅｘａｎｅ　ｐｒｉｏｒ　ｔｏ　ｔｈｅ　ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ　ａｎａｌｙｔｅｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｂｙ　Ｃ，８　ｃｏｌｕｍｎ．ｉｎｄｅｎｔｉｉｆｅｄ　ｂｙ　ｎｅｇａ—　ｔｉｖｅ　ｅｌｅｅｔｒｏｓｐｒａｙ　ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ（ＥＳＩ一）ａｎｄ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ（ＭＲＭ）ｍｏｄｅ．Ｔｈｅ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅｓ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ａｎｄ　ｃｌｅａｎｉｎｇ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｉｎ　ｄｅｔａｉｌ．Ｕｎｄｅｒ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｓｈｏｗｅｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．５　ｇ，Ｌ～２０　ｇ门Ｌ　ｏｒｆ　ｐｒｅｄ—　ｎｉｓｏｎｅ　ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｔａｒｇｅｔｓ　ｗｅｒｅ　０．１　ｇ／Ｌ～２Ｏ　Ｌ，ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｉｎ　ｃｈｉｃｋｅｎ　ｍｅａｔ　ｗｅｒｅ　８３％一１０４．２％ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｆｒｏｍ　１．０　ｔｘｇ／ｋｇ　ｔｏ　１０￣ｇ／ｋｇ，ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎ（ＲＳＤ）ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｂｅｔｅｅｎ　０．９２％ａｎｄ　４．８９％．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｙ；ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｒｃｏｉｄｓ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ；ｃｈｉｃｋｅｎ　ｔｉｓｓｕｅｓ　糖皮质激素常被用于治疗家畜的炎症反应、免　疫性疾病、牛的酮病等，属于畜产品常用的药物。　糖皮质激素激素属于类固醇激素（甾体激素），糖皮　质激素在体内作用广泛，不仅为糖、蛋白质、脂肪代　谢的调控所必需，且具有调节钾、钠和水代谢的作　用，对维持机体内外环境平衡起重要作用。合成类　目前测定食品中糖皮质激素类药物残留的方　法有气相色谱法（ＧＣ）、高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）、气　相色谱一质谱法（ＧＣ—ＭＳ）和液相色谱一质谱法（ＬＣ—　ＭＳ）Ｄ－１０］。其中，ＧＣ和ＨＰＬＣ方法的灵敏度较低，选　择性和特异性差，已经不适合用于痕量兽药残留分　析的要求。ＧＣ—ＭＳ方法虽然灵敏度和特异性都很　高，可以满足残留分析的要求，但需要繁琐的衍生　过程。ＨＰＬＣ—ＭＳ是分析动物源性食品中痕量兽药　糖皮质激素普遍的非法用途是为了增加家畜的饲　料摄人量从而使其达到增重的目的。　收稿日期：２０１４—１２—１５　作者简介：徐佳（１９８７－－），女，助理ｌＴ程师，主要从事食品安全工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｕｊ＠ｆａｉｒｒｅａｅｈ．ｃｏｎ　徐佳：液相色谱一串联质谱法检测鸡肉中７种糖皮质激素残留量　４３　残留的一种重要方法，该方法灵敏度高，选择性和　特异性好，能够对低浓度的样品进行很好的确认，　ＢＳ２１４Ｄ型电子天平（北京塞多利斯仪器系统有限公　司）、Ｍｉｌｌｉ—Ｑ超纯水纯化系统（美国Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）；　已用于测定不同基质中的糖皮质激素。但不管哪　种方法都需要对样品进行前处理，已有的文献报道　中针对糖皮质激素类药物的前处理基质样品一般　为药剂、化妆品、尿液等，前处理方法比较简单、干　扰小。针对动物源性食品，前处理过程一般有液液　萃取、旋转蒸发、固相萃取、氮气吹干等。此类前处　氮气吹扫仪（上海ＩＫＡ公司）、Ｔ一１８ｂａｓｉｃ均质器（德　国ＩＫＡ公司）、兢梨　发仪（德国ＨＥＤＯＬＰＨ）；４０００　ｒ／ｍｉｎ　低速离心机（德国ＳＩＧＭＡ）；Ｇ２Ｘ－ＧＦ型电热恒温干　燥箱（上海博泰实验设备有限公司）；ＫＱ５２００ＤＥ型　数控超声波清洗器（昆山市超市仪器有限公司）；７　种糖皮质激素标准物质均购自德国Ｓｉｇｍａ公司；所　理过程的缺点是反复萃取损失大、处理过程耗时　长、经济成本高、过程繁琐。少量文献针对肉制品　中糖皮质激素的前处理需要经过液液萃取、旋蒸浓　用溶剂和试剂均为分析纯或色谱纯；鸡肉样品为　市售。　１．２实验方法　１．２．１样品处理　缩、固相萃取净化等步骤，前处理过程繁琐耗时、提　取效率不高。　称取２　ｇ（精确至０．０１ｇ）均质混匀的鸡肉至　５０　ｍＬ离心管中，加入乙酸乙酯１５　ｍＬ，漩涡混合，　４０００　ｒ／ｍｉｎ离心１５　ｍｉｎ，移取乙酸乙酯层。于残渣中　加入０．１　ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液１０　ｍＬ，混匀，加乙酸乙　酯２０　ｍＬ，漩涡混合，４０００　ｒ／ｍｉｎ离心１５　ｍｉｎ，移取乙　本章采用传统的液液萃取方法对鸡肉样品中　的七种糖皮质激素进行提取，无需经过固相萃取和　氮气吹干过程，与现有的糖皮质激素类药物提取方　法相比，前处理过程操作简单、耗时短、有机溶剂用　量少、成本低，且结果可靠令人满意，灵敏度高、检　出限低，完全符合国家和欧盟的限量标准。通过不　酸乙酯层。合并两次提取液，４Ｏ℃旋转蒸发至近　干。于鸡心瓶中加入２　ｍＬ　１０％乙Ｎ／７１￣和２　ｍＬ经乙　断的摸索实验确定了一种高效简便的净化溶剂既　能达到去除油脂、蛋白质等杂质的目的，也无需复　杂的仪器或者净化装置，前处理过程大大简化，经　处理后的溶液可直接用于液相色谱一质谱联用仪分　析检测。　腈饱和的正己烷，漩涡混合，静置分层，下层溶液　１５０００　ｒ／ｍｉｎ离心５　ｍｉｎ，过０．２２　ｌｘｍ滤膜，上机测试。　１．２．２色谱一质谱条件　色谱柱：ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　Ｃ。。柱，（２．１ｘ５０　ｍｍ，　１．７　ｍ）；流动相：Ａ相为５　ｍｍｏｌ／Ｌ的乙酸铵混合液　（含０．１％甲酸溶液）；Ｂ相为乙腈；二元梯度洗脱：　０ｍｉｎ，Ａ、Ｂ两相体积比为９０：１０；４ｍｉｎ内，Ｂ相由１０％　１　实验部分　１．１仪器与试剂　线性升至５０％；７ｍｉｎ内，Ｂ相由５０％线性降至１０％；　流速０．２ｍＬ／ｍｉｎ；柱温３５℃；进样量体积为１０ｌｘＬ。质　谱条件见表１。　Ａｇｉｌｅｎｔ　１２００－６４１０液相色谱一质谱联用仪，ＥＳＩ　源，ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　Ｃｌｓ柱，２．１ｘ５０　ｍｍ，１．７　ｔｘｍ；　表１　７种糖皮质激素的质谱采集参数　注：　为定量离子。　离子源：电喷雾离子化（ＥＳＩ一）负离子模式；干燥器温度：３５０￣Ｃ；干燥气流速：１１Ｌ／ａｉｒｎ；喷雾气压力：３５ｐｓｉ；毛细管电压　４０００Ｖ；ＭＲＭ采集参数见表１。　福建分析测试技术交流　２结果与讨论　２。１　样品提取溶剂的选择　乙酸乙酯对目标物的溶解性很好。常见的糖　皮质激素类药物提取剂还有甲醇、丙酮、乙腈等溶　取出来，造成干扰。虽然乙酸乙酯在提取过程中有　会溶解部分油脂，但在后面的净化过程中加入饱和　了乙腈的正己烷刚好能把油脂等杂质去除，弥补了　这个缺陷。综合考虑，本实验选择乙酸乙酯为糖皮　』　＿质激素类药物的提取剂。　剂，但是从操作上看，甲醇、丙酮、乙腈溶于水，在后　啪　｜；　枷　ｍ　抛　面除杂过程中还得去除水分，操作繁琐耗时。而且　耋　Ⅲ　Ⅲ　ｍ　ｍ　２Ｉ２毫净化溶剂的选择　对于动物源性试样，脂肪和蛋白质等杂质是主　甲醇、丙酮、乙腈的极性很强，会把极性的杂质也提　要的干扰物质。大多数的前处理过程都需要加人　４５０　４００　泼尼松龙　４・　６７　４０４．４＞３２８．４　３５０　３０　０。　２００　１５Ｏ　１ｏｏ　Ｌ＾ｊ…　０　０　０　２　４　鲋朋ｔＪｍｌｎ　湖　枷　ｍ　枷　ｍ　０　２　４　Ｂ　８　ｅ／ｍｉｎ　１４ＯＯ　１２００　’ＯＯＯ　８００　６ＯＯ　４ＯＯ　２ＯＯ　Ｏ　Ｔｉｍｅ／ｍｌｎ　４５０　氢化可的松ｚｌ酸盐４００　３５Ｏ　３ＯＯ　４一　ｌ１２　４２４．４＞３４＆４　ｈ　２５０　２００　１５Ｏ　１Ｏ０　５Ｏ　Ｌ　图１　２　ｐｇ／ｋｇ加标水平７种糖皮质激素的提取离子流色谱图　徐佳：液相色谱一串联质谱法检测鸡肉中７种糖皮质激素残留量４５　蛋白质沉淀剂或者有机溶液去除部分蛋白质等杂　脂、脂肪的目的，又能使目标物很好的溶解，操作简　质，还需要辅助固相萃取柱等手段排除脂肪等杂质　的干扰。本实验对比了Ｓｉｌｉｃａ、ＨＬＢ、ＳＰＥ、Ｃ。。、Ｃ。等　固相萃取柱作为净化手段的萃取效率，实验结果表　便、成本低，经简单的前处理后的色谱图基本无杂　质干扰峰、提取效果好（见图１）。　２．３方法线性范围、相关系数、定量限　明过固相萃取柱后目标物的回收率都能达到７５％　以上，净化效果良好。但是从经济角度上考虑采用　取空白鸡肉样品按方法进行前处理得到空白　基质溶液，然后配制成浓度为Ｏ．１　２Ｏ　Ｌ的一系　列基质标准溶液进行ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ分析。以目标物色　固相萃取柱会造成检测成本提高，而且耗时较长。　本实验通过对比确定最佳分配比的溶剂１０％乙腈／　水和经乙腈饱和的正己烷，既能达到有效地去除油　谱峰的峰面积为纵坐标，目标物的质量浓度为横坐　标绘制工作曲线。实验结果可见表２。　表２　７种组分的线性回归方程及线性范围、相关系数、定量限　２．４方法回收率、相对标准偏差　２．５实际样品分析　在鸡肉中添加不同量的混合标准溶液，添加水　使用所建立的方法对市场上不同销售商的鸡　肉试样进行检测，结果表明有两家鸡肉中含有微　量的泼尼松龙、氢化可的松，其中氢化可的松的含　量小于０．５ｉ，ｚｇ／ｋｇ，低于我国规定的最大残留量。　平分别为１．０　ｔ￣ｇ／ｋｇ、５．０１ｘｇ／ｋｇ、１０．０　Ｉ．ｚｇ／ｋｇ，按上述实　验条件处理后，得到的各种糖皮质激素的回收率　（Ｒｅｃｏｖｅｒｙ）、相对标准偏差（ＲＳＤ）见表３。　表３　７种糖皮质激素的加标回收率、相对标准偏差（ｎ＝６）　福建分析测试续表３　技术交流　２０１５，２４（２）　比较了本章建立方法与农业部１０３１号公告一２—　３结论　建立了液液萃取快速提取检测鸡肉中七种糖　皮质激素多残留研究的分析方法，方法的定量限、　回收率、精密度能够满足实验要求，结果令人满意。　２００８方法对相同样品的测试结果（见表４），从表　中可以看出，两种方法的测试结果一致，偏差　较小。　表４不同样品中７种糖皮质激素的测定结果　注：ＮＤ一未检出　参考文献　【１】Ｄｅｌａｈａｕｔ　Ｐ，Ｊａｃｑｕｅｍｉｎ　Ｐ，Ｃｏｌｅｍｏｎｔｓ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｍｌｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅｖｅｒａｌ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｉｏｄｓ　ｂｙ　ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ——ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　ａｆｔｅｒ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｉｍ—　ｍｅｔｈａｓｏｎｅ　ａｎｄ　ｂｅｔａｍｅｔｈａｓｏｎｅ　ｉｎ　ｂｏｖｉｎｅ　ｕｒｉｎｅ　ｂｙ　ｐｕｒｉｆｉｃａ—　ｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ａｎ“ｏｎ—ｌｉｎｅ”ｉｍｍｕｎｏａｆｆｉｎｉｔｙ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｈｉｇｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｓｙｓｔｅｍ　ａｎｄ　ｄｅｔｅｒ．　ｕｉｎａｔｉｒｏｎ　ｂｙ　ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．Ａｎａ—　ｌｙｔｉｃａｌ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｙ，１９９６，２３５（２）：ｌ１ｒ９－１２６．　ｍｕｎｏａｆｆｉｎｉｔｙ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｂ：　［５］徐友宣，申利．用ＧＣ／ＭＳ法定性检测人尿中的可的松类　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９７，６９６（２）：２０３—　２ｌ５．　药物ｆＪ１．质谱学报，１９９６，１７（３）：４８—５１．　［６】李飞，谷丽丽，张岩，等．液相色谱一串联质谱法检测速　冻调制肉制品中糖皮质激素类药物残留［Ｊ］＿食品科学，　２０１０．２：０４０．　［２】Ｍｓｌｈｎａｎｎ　Ｈ，Ｒｏｈｄｅｗａｌｄ　Ｐ，Ｂａｒｔｈ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ　ｏｆ　ｍｅｔｈｙｌｐＩ　ｄｎｉｓ０ｌ０ｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ａｎｄ　ｈｅｍｉｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ｉｎ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ｒｅｓｅａｒｃｈ，　［７】Ｂａｌ￣ｉ　Ｋ，Ｒｅｄｄｙ　Ｇ　Ｖ　Ｒ，Ｒｅｄｄｙ　Ｔ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ，ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｅｏｒｔｉｓｏｎｅ　ｉｎ　ｐｈａｒ—　１９８８，５（８）：５０９—５１３．　【３］Ｓｈｉｂａｔａ　Ｎ，Ｈａｙａｋａｗａ　Ｔ，Ｔａｋａｄａ　Ｋ，ｅｔ　１．Ｓｉａｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅ—　ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｏｒ　ｕｒｉｎｅ　ｂｙ　ｈｉｇｈ—　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｗｉｔｈ　ｐｒｅｃｏｌｕｍｎ　ｆｌｕｏｒｉ—　ｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｆｌｕｉｄ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｂｙ　ｖｏｌｔａｍｍｅｔｉｒｃ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｕｓｉｎｇ　１３——ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ　ｍｏｄｉｉｆｅｄ　ｃａｒ—　ｂｏｎ　ｐａｓｔｅ　ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ．Ａｆｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　ａｎｄ　Ｐｈａｒ—　ｍｅｔｒｉｃ　ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ　ｂｙ　９－ａｎｔｈｒｏｙｌ　ｎｉｔｒｉｌｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏ—　ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｂ：Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．　ｍａｅｏｌｏｇｙ，２００８，２（８）：１５７—１６６．　【８】Ｐａｒｋ　Ｓ　Ｊ，Ｋｉｍ　Ｙ　Ｊ，Ｐｙｏ　Ｈ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅ—　ｒｏｉｄｓ　ｉｎ　ｕｒｉｎｅ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ａｎｄ　ｔｈｅｒｍｏｓｐｒａｙ　ＬＣ／ＭＳ．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　１９９８，７０６（２）：１９１—１９９．　［４】ＢａｇｎａｔｉＲ，Ｒａｍａｚｚａ　Ｖ，Ｚｕｃｃｈｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｄｅｘａ—　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，１９９０，１４（２）：１０２—１０８．　２０１５，２４（２）　徐佳：液相色谱一串联质谱法检测鸡肉中７种糖皮质激素残留量４７　【９】Ｄｕｍｏｕｌｉｎ　Ｆ，Ｅｌｌｉｏｔｔ　Ｃ，Ｖａｎ　Ｐｅｔｅｇｈｅｍ　Ｃ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｙｎ—　［０】赵宝华．液相色谱一串联质谱方法检测速冻调制肉制品中　ｔｈｅｔｉｃ　ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｉｎ　ｃａｔｔｌｅ　ｔｉｓｓｕｅ　ａｎｄ　ｈａｉｒ　ｓａｍ・　糖皮质激素类药物残留【Ｊ】．食品科学，２０１０，３１（２）：１５４—　ｐｉｅｓ　ａｆｔｅｒ　ａ　ｓｉｎｇｌｅ　ｄｏｓｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ．　１５６．　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｂ，２００５，８１７（２）：２１５－２２３．　文后参考文献表排写格式（参ＧＢ／Ｔ　７７１４—２００５《文后参考文献著录规则》）　参考文献按在正文中出现的先后次序列表于文后，表上以“参考文献”居中排作为标识；参考文献的序号左　顶格，并用数字加方括号表示，如【１】，【２　・，以与正文中的指示序号格式一致．每一参考文献条目的最后均以“．”　结束．各类参考文献条目的编排格式及示例如下．　ａ．连续出版物　【序号］主要责任者．文献题名［Ｊ］．刊名，出版年份，卷号（期号）：起止页码．　例３１：［１】袁庆龙，候文义．Ｎｉ—Ｐ合金镀层组织形貌及显微硬度研究［Ｊ】．太原理工大学学报，２００１，３２（１）：５１－５３．　ｂ．专著　［序号】主要责任者．文献题名［Ｍ］．出版地：出版者，出版年：起止页码．　例如：［３】刘国钧，王连成．图书馆史研究［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９７９：１５－１８，３１．　ｃ．论文集　【序号】主要责任者．文献题名【Ｃ】／／主编．论文集名．出版地：出版者，出版年：起止页码．　例如：【６】孙品一．高校学报编辑工作现代化特征［ｃ】．中国高等学校自然科学学报研究会．科技编辑学论文集　（２）．北京：北京师范大学出版社，１９９８：１０—２２．　ｄ．学位论文　【序号］主要责任．文献题名［Ｄ］．保存地：保存单位，年份．　例如：［７】张和生．地质力学系统理论［Ｄ］．太原：太原理工大学，１９９８．　ｅ．报告　【序号】主要责任．文献题名【Ｒ］．报告地：报告会主办单位，年份．　例如：［９】冯西桥．核反应堆压力容器的ＬＢＢ分析［Ｒ］．北京：清华大学核能技术设计研究院，１９９７．　ｆ．专利文献　【序号】专利所有者．专利题名［Ｐ］．专利国别：专利号，发布日期．　例如：【１　ｌ】姜锡洲．一种温热外敷药制备方案［Ｐ】．中国专￣：８８１０５６０７８，１９８３－０８－１２．　ｇ．国际、国家标准　［序号】标准代号，标准名称［ｓ］．出版地：出版者，出版年．　例如：［１］ＧＢ／Ｔ　１６１５９－－１９９６，汉语拼音正词法基本规则［Ｓ】．北京：中国标准出版社，１９９６．　ｈ．报纸文章　［序号】主要责任者．文献题名［Ｎ】．报纸名，出版日期（版次）．　例３１：［１３］谢希德．创造学习的思路［Ｎ］．人民日报，１９９８—１２—２５（１０）．　ｉ．电子文献　［序号］主要责任者．电子文献题名［文献类型／载体类型］．电子文献的出版或可获得地址，发表或更新的期／引用日　期（任选）．　例３１１：［２１］王明亮．中国学术期刊标准化数据库系统工程的［ＥＢ／ＯＬ］．　ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｊｃｄ．ｃｎ／ｐｕｂ／ｗｍ１．ｔｘｆｆ９８０８　１０－２．ｈｔｍ１．１９９８－０８－１６／１９９８—１０—０４．